宮頸癌是公認的唯一發(fā)病機理明確、癌前病變周期較長、可以預(yù)防和阻斷的惡性腫瘤，如果早期發(fā)現(xiàn)和治療癌前病變，子宮頸癌的預(yù)防和治愈率幾乎接近100%[1]。今年第二十一次全國子宮頸癌協(xié)作組工作會議明確提到——現(xiàn)有許多研究表明，p16/ki-67、宮頸癌基因甲基化等檢測方法，在宮頸癌初篩陽性后的精細分流管理中將發(fā)揮核心作用，這也預(yù)示了宮頸癌篩查策略未來的發(fā)展趨勢。
迪安生物近日新上市P16/Ki-67檢測試劑盒（免疫細胞化學(xué)法）（浙杭械備20240533、浙杭械備20240534），自有免疫組化平臺可實現(xiàn)原位雜交（EBER）以及細胞雙染的完整試驗，為實驗室與醫(yī)院提供包含HPV檢測試劑、TCT檢測產(chǎn)品等多樣選擇。
1. 宮頸癌篩查方法：傳統(tǒng) VS. 雙染
宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個由宮頸不典型增生連續(xù)發(fā)展至宮頸癌的過程，高危型 HPV 持續(xù)性感染是宮頸癌及其癌前病變發(fā)生的主要原因[2]。宮頸癌早期或無明顯特異性癥狀，難以經(jīng)臨床表現(xiàn)進行早期篩查，且癌前病變時期較長。因此，早期篩查的準確性對宮頸癌的診療及預(yù)防具有較高價值。
傳統(tǒng)檢測方法
1950年以來普遍采用宮頸巴氏涂片進行宮頸癌篩查，早期病變檢出率已明顯提升，但診斷準確度仍不理想，有文獻報道巴氏涂片的假陰性率至少為15%～20%[3]，Joseph等報道巴氏涂片的假陰性率甚至高達53%[4]，主要原因是涂片中有診斷意義的細胞太少。傳統(tǒng)巴氏涂片制片時刮板上的細胞只有少量被轉(zhuǎn)移到玻片上，且可能存在細胞范圍不全、細胞重疊、背景不清等情況。
隨著醫(yī)療技術(shù)發(fā)展，目前宮頸癌篩查主要采用宮頸液基細胞學(xué)檢查（fluid based thin-layer cytological test，TCT）、人乳頭瘤病毒( human papilloma virus，HPV)檢測，或兩者聯(lián)合篩查。
迪安生物TCT檢測產(chǎn)品
TCT和HPV檢測均存在相對不足，如宮頸液基細胞學(xué)篩查無明確意義的非典型鱗狀細胞(atypical squamous cells of undermined significance，ASC-US)診斷過多[5]，HPV檢測難以排除一過性感染的影響，對于人口眾多的地區(qū)和國家，檢測特異性不高，將帶來后續(xù)大量的臨床工作[6]。p16/Ki-67免疫細胞化學(xué)雙染法則可有效彌補HPV檢測的低特異度及細胞學(xué)檢測的低靈敏度，降低漏診及不必要的陰道鏡檢查。
細胞雙染檢測方法
早在2011年，臨床上就提出采用 p16 與 Ki-67 免疫細胞化學(xué)雙染的方法來發(fā)現(xiàn)高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade intraepithelial neoplasia，HSIL)和子宮頸鱗狀細胞癌 (squamous cell carcinoma，SCC)。商業(yè)化雙染試劑盒的出現(xiàn)，使這一技術(shù)在國內(nèi)宮頸液基細胞學(xué)診斷實踐中受到關(guān)注。
多項研究表明p16/Ki-67免疫細胞化學(xué)雙染法具有以下優(yōu)點：
①針對HPV初篩陽性分流，具備相對的特異性和靈敏度優(yōu)勢，且對不同疾病類型總檢出率更高，能夠有效提高 HSIL陽性檢出率[7]；
②可較好地區(qū)分細胞學(xué)陰性病灶，降低宮頸癌的漏診率及陰道鏡檢誤診率[8]；
③檢測所需樣本較易獲取，患者機體造成的損傷較小，重復(fù)性高，可避免患者發(fā)生不耐受現(xiàn)象[9]；
④對LSIL的轉(zhuǎn)歸預(yù)測有一定價值[10]；
⑤判讀不依賴形態(tài)學(xué)，所獲結(jié)果易于觀察分辨，有效減輕醫(yī)生工作負擔(dān)[11]。
綜上，p16/Ki-67細胞學(xué)雙染檢測對于宮頸癌初篩異常后的分流及管理有重要的臨床參考價值，可認為其在HPV單獨初篩陽性后的分流方面優(yōu)于細胞學(xué)分流。
2. 什么是p16/Ki-67免疫細胞化學(xué)雙染法？
p16
p16是一種抑癌蛋白，主要促進E2F和pRB結(jié)合來調(diào)控細胞周期。當(dāng)細胞持續(xù)性感染HR-HPV后，其產(chǎn)生的病毒性E7蛋白會替代E2F，與pRB結(jié)合，導(dǎo)致無法形成E2F-pRB復(fù)合物，破壞細胞周期調(diào)控機制，導(dǎo)致細胞持續(xù)增殖，最終出現(xiàn)p16蛋白過度表達并累積。
細胞周期正常表達與失控表達示意圖
Ki-67
Ki-67是目前應(yīng)用最廣泛、最可靠的細胞增殖標志物之一，與多種腫瘤的發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)，表達于鱗狀上皮細胞的細胞核，其高表達預(yù)示癌前病變的發(fā)生及組織惡變。
p16/Ki-67
正常細胞中p16和Ki-67表達相互排斥，若同時表達，則提示細胞周期調(diào)控失常，是高危型HPV感染的標志，可提示較高級別病灶。
p16/ki-67雙染檢測陰性：提示樣本中未檢測到高危型HPV持續(xù)性感染引起的p16/ki-67蛋白共表達，患者遵醫(yī)囑隨訪；
p16/ki-67雙染檢測陽性：提示高危型HPV持續(xù)性感染，與高級別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）相關(guān)，患者需要及時就診，在醫(yī)生的幫助下行陰道鏡檢查，避免機體內(nèi)存在癌前病變的情況。
p16/Ki-67 表達圖解
3. 金迪安?P16/Ki-67檢測試劑盒
迪安生物最新上市p16/Ki-67檢測試劑盒，有效完善宮頸癌篩查診斷方案，試劑染色結(jié)果對比明顯，色彩鮮艷，檢測結(jié)果直觀，易于判讀。
染色結(jié)果判讀示例
p16 單染：胞漿棕黃色著色為（+），表示細胞周期停止。
Ki-67 單染：胞核玫紅色著色為（+），提示細胞增值。
p16/Ki-67 雙染：在同一個細胞中核被染成紅色、漿被染成玫棕黃色，且處于同一顯微鏡焦距下，即判讀為 p16/Ki-67 雙染（+），解讀不依賴于細胞形態(tài)學(xué)標準，一張片子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)一個雙染色細胞即說明雙染結(jié)果呈陽性。
參考文獻
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